Adenovirws Cyfrinach Prawf-Trwynol Cyflym

Defnydd arfaethedig:

Mae pecyn Prawf Asid Niwcleig SARS-CoV-2 yn berthnasol i ganfod ansoddol asid niwclëig o COVID-19 mewn swabiau trwynoloffaryngeal, swabiau oroffaryngeal a sbwtwm. Mae canlyniadau'r profion yn darparu sail diagnosis moleciwlaidd ar gyfer haint neu gleifion a amheuir, ac ni ddylid eu defnyddio fel yr unig faen prawf ar gyfer diagnosis clinigol.

Deunyddiau:

Gweithdrefn Prawf:

A. Paratoi Sampl

RNA wedi'i dynnu yw'r deunydd cychwyn ar gyfer pecyn Prawf Asid Niwcleig SARS-CoV-2.

Pwysig: Rhaid cyflawni pob gweithdrefn echdynnu asid niwclëig ar yr un pryd ag un rheolaeth gadarnhaol (40 μL, gwanhau â hydoddiannau halwynog di-haint / PBS i'r cyfaint a ddymunir) ac un rheolaeth Negyddol (40 μL, ei wanhau â hydoddiannau halwynog di-haint / PBS i'r cyfaint a ddymunir).

Argymhellir defnyddio'r pecynnau echdynnu asid niwclëig masnachol canlynol: Pecyn Mini RNA/DNA firaol PureLinkTM (Invitrogen); Pecyn mini RNA firaol (QIAGEN); Pecyn Hi-DNA/RNA TIANamp (TIANGEN);

B. Gosodiad Cymysgedd Adwaith

1. Dylai'r holl adweithyddion a samplau gael eu dadmer yn llwyr, eu cymysgu'n llwyr a'u centrifugio'n fyr ar dymheredd yr ystafell (tua 18 i 25 gradd) cyn eu defnyddio.

2. Paratowch gyfaint gofynnol y Cymysgedd Adwaith mewn tiwb microcentrifuge polypropylen o faint priodol.

3. Pibed 25 µL o'r Cymysgedd Adwaith i bob ffynnon ofynnol o blât adwaith ffynnon optegol priodol neu diwb adwaith optegol priodol.

C. Ychwanegiad templed

1. Ychwanegu 5 μL o RNA wedi'i dynnu o Samplau/Rheolaeth gadarnhaol/Rheolaeth negyddol. Cyfanswm y cyfaint yw 30 μL.

2. Cymysgwch y samplau a'r rheolyddion yn drylwyr gyda'r Cymysgedd Adwaith trwy bibellu i fyny ac i lawr / Vortex.

3. Caewch y 96-plât adwaith ffynnon gyda chaeadau priodol neu ffilm gludiog optegol a'r tiwbiau adwaith gyda chaeadau priodol.

4. Allgyrchu'r plât adwaith ffynnon mewn centrifuge gyda rotor plât microteitr am 30 eiliad ar tua 2500rpm.

D. Rhaglennu'r Offeryn PCR Amser Real

I gael gwybodaeth sylfaenol am osod a rhaglennu'r gwahanol offerynnau PCR amser real, cyfeiriwch at lawlyfr defnyddiwr y prawf offeryn priodol. Mae'r assay wedi'i optimeiddio ar gyfer system PCR Amser Real ABI7500. Perfformir y rhediad PCR gydag amodau beicio fel y disgrifir yn y tabl isod.

Diffiniwch y synwyryddion fflworoleuedd

* Os gwelwch yn dda gosodwch gyfeiriad fflworoleuedd mewnol yr offeryn i "Dim", er enghraifft: Ar gyfer offerynnau cyfres ABI gosodwch "Goddefol Cyfeiriad" i "Dim".

E. Dadansoddi data

Gosodwch y paramedrau dadansoddi a dadansoddwch y data yn unol â chyfarwyddiadau gweithredu'r offerynnau perthnasol.

Cymerwch ABI 7500 fel enghraifft:

Dylid gosod y Llinell Sylfaen i ystod sy'n dileu'r fflworoleuedd cefndir a geir yn y cylchoedd chwyddo cynnar, ond nad yw'n gorgyffwrdd â'r ardal lle mae signalau mwyhad yn codi uwchlaw'r cefndir (Gwerth cychwyn: 3 ~ 10; Gwerth diwedd: {{2} }). Dylai'r Trothwy Beicio (Ct) fod ar waelod y cyfnod esbonyddol. Cliciwch "Dadansoddi" i gael canlyniad y dadansoddiad yn awtomatig, a darllenwch y canlyniad canfod yn y ffenestr "Adroddiad".

Tagiau poblogaidd: adenofirws cyflym prawf - trwynol secretion, Tsieina, cyflenwyr, gweithgynhyrchwyr, ffatri, swmp